下面是處理和重復(fù)使用超濾管的步驟。將超濾管中的水倒出來(lái),用Milliq水輕輕沖洗幾次。[如管底有可見(jiàn)蛋白質(zhì)沉淀,可先加水,再用設(shè)備頭吹氣,注意不要碰觸膜,吹氣至沉淀懸浮,再倒出,不要沖自來(lái)水。)然后加入0.2 mNaOH溶液,室溫放置20分鐘,平衡超濾。在此期間定量管。離心10分鐘。倒出剩余的MaOH溶液,將管芯浸入Milliq燒杯(1L或2L)中。放器數(shù)小時(shí),然后用新水替換,放置數(shù)小時(shí),不斷稀釋Na0E濃度。50ml管道和蓋子用自來(lái)水沖洗,內(nèi)壁用Milliq水沖洗。取出浸入水中的芯,并將其加入幾乎滿(mǎn)毫升的水中。在50毫升試管中注入毫升水。慢慢地將芯放入50毫升離心管中,排出一些水。然后蓋上蓋子,4度存放,直到下次使用。一般來(lái)說(shuō),根據(jù)上述步驟和注意事項(xiàng),每根渠道在三到四年內(nèi)不會(huì)受損。超濾離心管通常由聚碳酸酯或聚丙烯制成,具有強(qiáng)度高和化學(xué)惰性。青島10K超濾離心管使用方法
超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過(guò)目標(biāo)分子量的一半。因?yàn)槌瑸V膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時(shí)需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間或者過(guò)速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計(jì),可避免過(guò)度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免過(guò)度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時(shí)補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。青島高離心力離心管生產(chǎn)公司超濾離心管還可以用于檢測(cè)樣品中的元素、抗體等生物活性分子。
實(shí)驗(yàn)室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用得較多,因?yàn)椴AУ碾x心管不能用在高速或者超速離心機(jī)上。塑料的離心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP(聚丙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對(duì)來(lái)說(shuō)比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀地看到樣品的離心情況,但是比較容易變形,抗有機(jī)溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)經(jīng)常購(gòu)買(mǎi)離心管。PC (聚碳酸酯):透明度較好,硬度大,可以高溫消毒,但不耐強(qiáng)酸強(qiáng)堿以及一些有機(jī)溶劑如酒精之類(lèi)。主要用于5萬(wàn)轉(zhuǎn)以上的超高速離心。PE(聚乙烯):不透明。和丙銅、醋酸、鹽酸等不反應(yīng),較為穩(wěn)定,高溫下容易變軟。PP(聚丙烯):半透明,化學(xué)及溫度穩(wěn)定性較好,但是在低溫下會(huì)變脆,所以在離心時(shí)不要在4℃以下。
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,較常見(jiàn)的是10kD。到底選擇多大截留分子量比較合適呢?10kDa、 5kDa、還是30kDa?通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書(shū),注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同,表格中有。新買(mǎi)來(lái)的超濾是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過(guò)膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過(guò)管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。使用超濾離心管時(shí)要注意控制轉(zhuǎn)速,以避免過(guò)度旋轉(zhuǎn)導(dǎo)致超濾膜損壞或溢出樣品。
A(聚酰胺):這種材質(zhì)是PP和PE材質(zhì)的聚合物,半透明,化學(xué)性質(zhì)非常穩(wěn)定,單不耐高溫。PF(聚氟):半透明,可以低溫使用,如果是-100℃-140℃下的實(shí)驗(yàn)環(huán)境,就可以用這種材質(zhì)的離心管。CAB(醋酸丁酯纖維素):透明,可用于較稀的酸、堿、鹽,以及酒精、蔗糖的梯度測(cè)定。PS(聚苯乙烯):透明,硬度大,對(duì)大多數(shù)的水溶液穩(wěn)定,但是會(huì)被多種有機(jī)物腐蝕,多用于低速離心,而且一般是一次性使用。離心管分類(lèi):按材質(zhì)可分:塑料離心管、玻璃離心管和不銹鋼離心管等。按速度可分:低速離心管和高速離心管。按容量可分:微量離心管、小容量離心管和大容量離心管。一般稱(chēng)容量大于100mL的離心管為離心瓶。超濾離心管是一個(gè)快速、便捷的方法來(lái)從混合物中分離和提取大分子,如蛋白質(zhì)、核酸等。深圳高離心力離心管公司
超濾離心管還可用于檢測(cè)藥品樣品中的殘留物和污染物,并進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)測(cè)和控制。青島10K超濾離心管使用方法
超濾離心管只需5到15分鐘,即可對(duì)50到500L樣本進(jìn)行簡(jiǎn)便、可靠的濃縮與脫鹽處理:快速處理樣本。通常,回收率高于90%;備有低蛋白質(zhì)結(jié)合的Omega、Bio-Inert或GHP濾膜可供選擇。對(duì)應(yīng)各種截留分子量,備有各種編碼以供輕松識(shí)別的顏色可供選擇。結(jié)構(gòu)材料為低結(jié)合聚丙烯。超聲焊接密封,防止側(cè)流或密封不嚴(yán)。適用于配合1.5mL試管的標(biāo)準(zhǔn)離心轉(zhuǎn)子。超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過(guò)對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來(lái)說(shuō)(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附較小化,但是,某些蛋白,特別是稀的時(shí)候,會(huì)有問(wèn)題。非特異結(jié)合的程度隨著個(gè)別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同。青島10K超濾離心管使用方法
超濾離心管具有多種容量和規(guī)格,以滿(mǎn)足不同實(shí)驗(yàn)需求。在選擇時(shí),需綜合考慮樣本量、目標(biāo)分子濃度、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.. [詳情]
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2025-04-27