超濾離心管從細(xì)胞培養(yǎng)上清液中濃縮蛋白，在園子里找到一些關(guān)于濃縮蛋白的一些帖子，但還有些問題還是向園子里的大蝦請(qǐng)教一下。我們定的是 15ml規(guī)格的管子，不知道有沒有誰以前做過的，有關(guān)于轉(zhuǎn)速，時(shí)間給一些建議，另外細(xì)胞上清液離心前是否需要什么預(yù)處理？離心之后回收蛋白時(shí)怎么盡量減少損失？如果要把管子重復(fù)利用，NaoH清洗后，如何在20%的乙醇中保存？是將其浸到乙醇中防于4度，還是在管子中灌入乙醇？我用過5ml的管子，當(dāng)時(shí)使用的轉(zhuǎn)速是4000rpm 8min，可以把5ml的樣品液濃縮到約200ul，這只供參考，具體情況還要由您的樣品決定。我保存5ml管子的方法是把內(nèi)管取出，浸泡于裝有20％乙醇的燒杯中。四度保存。超濾離心管可根據(jù)不同孔徑大小選擇超濾膜，以便過濾出所需大小范圍內(nèi)的目標(biāo)分子。安徽超濾離心管排行榜

按用途可分：制備型離心管和分析型離心管。大量離心管(500mL、250mL)。普通離心管(50mL、15mL)。微量離心管(2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL) 塑料離心管，玻璃離心管，鋼制離心管。1、塑料離心管。塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的，它的硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺點(diǎn)是易變形，抗有機(jī)溶劑腐蝕性差，使用壽命短。塑料離心管都有管蓋，它的作用是防止樣品外泄，尤其是用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí)防止樣品外泄是很重要的一點(diǎn)；管蓋還有一個(gè)作用是防止樣品揮發(fā)以及支持離心管，防止離心管變形。在挑選這一點(diǎn)的時(shí)候還要注意檢查管蓋是否嚴(yán)密，在試驗(yàn)時(shí)能否蓋嚴(yán)，以到達(dá)倒置不漏液；我們都知道在塑料離心管中，常用材料有聚乙烯(PE)，聚碳酸酯(PC)，聚丙烯(PP)等，其中聚丙烯PP管性能會(huì)相對(duì)較好，所以，我們?cè)谔暨x塑料離心管時(shí)盡可能的考慮聚丙烯的塑料離心管。浙江3K超濾離心管選擇超濾離心管可以用于分離各種生物樣品，如血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液、酶溶液等。

離心機(jī)的加速度調(diào)至較低檔，減小對(duì)膜的壓力。注意，一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后，方可離開離心機(jī)，否則離心機(jī)出問題時(shí)，無法一時(shí)間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整（角轉(zhuǎn)離心機(jī)的情況是膜與軸垂直）。在實(shí)際使用中，一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低，這樣可以延長(zhǎng)離心管的使用壽命。當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí)，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍(lán)色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測(cè)，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。

超濾管采用其特有的再生纖維素膜，定義為：一個(gè)確定NMWL 的超濾膜應(yīng)該截留至少90% 以上的這個(gè)大小的球形分子，即100kDa的球形蛋白用100k的再生纖維素膜得率超過90%。請(qǐng)仔細(xì)查看以下默克生命科學(xué)官方數(shù)據(jù)：(以0.5mL的AU0.5為例，其它型號(hào)截留分子量的選擇原則一致，具體離心力和離心時(shí)間不同。截留分子量選小啦！看到這個(gè)表，你是否發(fā)現(xiàn)原來抱怨超濾管流速偏慢的根源來自對(duì)于截留分子量定義的誤解。膜孔徑要小于目的分子這是一原則。如果分子有近似球形的立體結(jié)構(gòu)(而非明顯的線性分子)，在再生纖維素超濾膜體系內(nèi)，選擇“等于”或“略小于”目的分子的截留分子量的超濾管是較佳選擇，這樣操作起來又快又好，既保證了樣品回收率，又縮短了離心時(shí)間，大幅降低大分子損傷風(fēng)險(xiǎn)。超濾離心管的優(yōu)點(diǎn)包括速度快、效率高、易于操作和清洗等。

超濾作為一種膜分離技術(shù)，普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換，其原理是溶液在力的作用下，通過超濾膜孔徑的篩濾，大分子量的顆粒被截留下來，而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜，從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的，這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快速、高效，可同時(shí)濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上，較大樣本量為15 毫升（Anavo Ultra-15）。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個(gè)類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時(shí)，將薄膜面板朝上定位，較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg，旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì)，在過濾裝置的底部插入一個(gè)移液管，通過左右掃動(dòng)的方式將樣品抽離，以保證總回收率。超濾液可貯存在離心管中。說明：為達(dá)到較佳回收率，離心后應(yīng)立即取出濃縮樣品。超濾離心管在醫(yī)學(xué)診斷和緩解中也具有重要作用，如血液透析、肝功能檢測(cè)等領(lǐng)域。浙江3K超濾離心管選擇

超濾離心管可用于分離和純化各種大分子化合物，如蛋白質(zhì)、核酸、多糖等。安徽超濾離心管排行榜

離心管主要有塑料、不銹鋼制成，塑料離心管常用資料有聚丙烯（PP）.聚乙烯（PE），聚碳酸酯（PC）等。其中PP管性能較好，塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明（或半透明），硬度小，可用穿刺法取出梯度，缺陷是易變形，抗有機(jī)溶劑腐蝕性差，運(yùn)用壽命短；不銹鋼離心管強(qiáng)度大，不變形，能抗凍，抗熱，抗化學(xué)腐蝕，但用時(shí)要防止接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品、如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等化學(xué)試劑。這里主要介紹塑料離心管：塑料離心管都有管蓋，離心前管蓋必需蓋嚴(yán)，倒置不漏液。管蓋有三種作用：①避免樣品外泄，用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí)②避免樣品揮發(fā)③支持離心管，避免離心管變形。安徽超濾離心管排行榜